着一盆米汤走进了窑洞里。
这次汤钧山直接将之前那罐米汤中养出来的菌丝放在新的米汤在,还是五天的时间,一盆的米汤上面长满了菌丝。
这里面的菌株太多,不确定哪些是含有青霉菌的菌株,想要挑选出具有青霉菌的菌株就只能做试验。
好在延州这边也有医院,王铁亲自出面,从医院找了两个受伤比较严重的患者,从他们伤口处提取了脓液。
脓液里面含有金黄色葡萄球菌或链球菌,最适合用来做这种实验。
将脓液放在器皿中,汤钧山和那两个助手就开始不停的做实验,用菌株和脓液进行混合,在用显微镜观察,只要脓液中的金黄色葡萄球菌或链球菌死亡,就表明这份菌株里含有青霉菌。
这个过程很枯燥,持续了快一个月的时间才让汤钧山他们筛选出青霉菌菌株。
为了能够让菌种纯化,汤钧山又用无菌棉签刮取霉斑粉末,接种到自制琼脂培养基中,这个培养基是用煮沸后凝固的米汤+3琼脂,25c恒温培养3天。选取单菌落重复划线分离3次,获得纯菌株。
有了菌株,提取与纯化也是必不可少的。这些王铁也不懂,只能像石像一般待在一间办公室里给汤钧山他们坐镇,所有的技术性问题都要汤钧山他们自己解决。
好在是制药和化学是分不开的,和生物学也是息息相关。老毛子的制药专家也还是有两把刷子的,汤钧山他们愣是从老毛子那学来了不少提纯的办法。
一帮人忙活了半天,将发酵液经双层纱布过滤后,加入30菜籽油搅拌10分钟,静置分层后抽取下层含有含青霉素的水相。
又将水相与烧制200目细度硬木炭粉按1:03混合搅拌,吸附30分钟后离心收集炭粉。依次用蒸馏水、5醋酸溶液除碱性杂质、1碳酸钠溶液洗脱青霉素,去除炭粉,收集ph70的洗脱液。
最后再进行结晶干燥,洗脱液低温(40c)蒸发浓缩至原体积1\/10,加入3倍体积丙酮诱导结晶,滤纸过滤后阴干获得淡黄色粉末。
“这就成了吗?”王铁小心翼翼的看着手中的那个小小的玻璃瓶子,里面是小半瓶淡黄色的药粉。
此刻王铁都有些不相信这药粉就是价格堪比黄